Pregătiţi-vă pentru cea mai sălbatică şi plină de aventuri Noapte la Muzeu din câte au fost, cu Larry Daley (Ben Stiller) călătorind în jurul pământului, unind personajele favorite cu altele noi şi îmbarcându-se într-o căutare epică pentru a salva magia înainte de a dispărea pentru totdeauna.
Când exponatele Muzeului de Istorie Naturala din New York, care prind viață în timpul nopţii, încep să se comporte ciudat, Larry, nou-promovat ca director de operațiuni pe timp de noapte la Muzeu, trebuie să afle care este cauza. Tableta, care aduce la viaţă creaturile în mod magic, a început să putrezească și singura modalitate de a remedia acest lucru poate fi la Muzeul Britanic . Larry, care va face orice pentru a-şi salva "familia" din muzeu, împreună cu fiul său Nick și exponatele muzeului, călătoresc de la New York la Londra, unde trebuie să descopere secretul tabletei.